一、實驗概念

免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質(zhì)印跡（Western blotting），是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測，可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。Western Blot方法成熟，大多實驗室均具備Western Blot的實驗?zāi)芰Γ玫揭环荼尘扒逦?、條帶明亮、真實客觀的實驗結(jié)果需要豐富的實踐經(jīng)驗，我們技術(shù)人員在樣品處理、轉(zhuǎn)膜和抗體稀釋比例等操作上具有豐富的操作經(jīng)驗，能夠在短時間內(nèi)為客戶優(yōu)化實驗條件，提供客觀真實的實驗結(jié)果。

二、實驗流程：

客戶提供樣本及靶蛋白抗體→蛋白樣本抽取及定量→上樣→電泳→轉(zhuǎn)膜→封閉→抗體孵育顯色→膠片灰度分析數(shù)據(jù)處理

三、注意事項：

1.組織樣本，離體后盡快凍存。

2.有條件的話，最好先將樣本在液氮中速凍，再轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中保存。

3.對于心肝脾腎等組織可每50~100mg加1ml裂解液，肺100~200mg加1mg裂解液。加入裂解液前，盡量將組織剪成小塊。

4.少量指標，組織需要提供的樣本量要求50mg或更多；細胞樣本需要提供六孔板一個孔的細胞量或更多。

5.客戶可提供目標蛋白一抗（我司可代購）

6.我司可免費提取蛋白、提供二抗、免費內(nèi)參，如GAPDH，β-actin等