動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
大鼠脊髓損傷動(dòng)物模型
脊髓損傷模型種類繁多,各有其優(yōu)缺點(diǎn),在應(yīng)用時(shí)應(yīng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)研究目的和條件作出科學(xué)的選擇。目前。大鼠作為一種價(jià)格便宜、容易飼養(yǎng)的動(dòng)物,作為制作脊髓損傷模型還有如下特點(diǎn):再現(xiàn)性好;臨床相關(guān)性好;與人類高度同源性;重復(fù)性強(qiáng);適應(yīng)范圍廣;操作簡單;死亡率低等。
大鼠脊髓損傷(全斷)動(dòng)物模型的建立:
使用眼科剪直接剪斷大鼠胸椎T10處脊髓的方法建立大鼠脊髓損傷模型,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)前6h禁食;
實(shí)驗(yàn)器材:
彎鑷1把、中號(hào)手術(shù)剪1把、眼科剪1把、止血鉗1把、自制輔助彎鉤、4-0縫線、縫合針、醫(yī)用碘伏、干棉球、棉簽、青霉素鈉等。
造模過程:
大鼠稱重,采用7%水合氯醛(0.5ml/100g)腹腔注射麻醉動(dòng)物,電動(dòng)剃毛器剃背部毛發(fā),取動(dòng)物俯臥位固定于手術(shù)板上,醫(yī)用碘伏消毒手術(shù)區(qū)皮膚。大鼠胸椎T10節(jié)段定位:觸及大鼠背部,找到胸椎高點(diǎn),往上數(shù)3個(gè)棘突對應(yīng)的椎體位置即為胸椎T10節(jié)段;
在T9~11節(jié)段對應(yīng)背部行正中直切口,止血鉗鈍性分離開口皮膚與肌肉層之間的黏膜。輔助固定鉤拉開兩側(cè)皮膚,充分暴露手術(shù)區(qū)肌肉視野,眼科剪于中線(棘突邊緣)兩側(cè)肌肉行直切口。如果有少量出血,使用棉簽清潔手術(shù)區(qū),眼科剪剪掉T9~11節(jié)段區(qū)域棘突及其他少量多余肌肉組織,充分暴露T9~11節(jié)段椎板。
左手握住大鼠腋下兩側(cè)固定大鼠并使其脊柱稍往上提,右手持止血鉗咬除T10節(jié)段椎板,暴露T10節(jié)段脊髓。使用自制輔助彎鉤(1ml注射器制作)伸入暴露的T10節(jié)段脊髓下方,稍向上挑起脊髓。使用眼科剪完全剪斷挑起的T10節(jié)段脊髓,但要小心操作,不要傷到其他組織,傷口處灑少量青霉素鈉消炎。
縫合內(nèi)層肌肉和創(chuàng)口皮膚(逐層縫合),止血鉗夾閉縫合處皮膚,酒精棉球,干棉球擦凈創(chuàng)口周圍血跡并消毒,將大鼠俯臥位放回籠中,正常飲食飼養(yǎng)。
術(shù)后護(hù)理:
模型構(gòu)建成功后,大鼠出現(xiàn)后肢功能障礙且不能自主排尿,所以后期每天需要人工輔助其排尿,并使用75%酒精噴灑消毒,此護(hù)理過程需要花費(fèi)大量時(shí)間。術(shù)后第二天,如果傷口愈合情況良好,可以對模型大鼠進(jìn)行人工輔助排尿。
操作方法:實(shí)驗(yàn)人員雙手戴上棉布厚手套,左手以麻醉大鼠的手法抓取固定大鼠(但是需注意不要過度用力,以免擠壓到背部傷口或大鼠胸腔),右手手掌托住大鼠腹背部,右手食指摸索找到膀胱,適當(dāng)用力擠壓膀胱,尿液就會(huì)從尿道流出。術(shù)后需每天排尿一次,并使用75%酒精在尿道附近噴灑消毒,衛(wèi)生紙擦拭干凈尿道周圍污漬。如果護(hù)理情況良好,一般術(shù)后一周,大鼠會(huì)恢復(fù)自主排尿功能。前期護(hù)理過程中,大鼠可能會(huì)尿血,屬正?,F(xiàn)象。