病理實(shí)驗(yàn)
免疫組化/IHC-P
一、概念
免疫組化,是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)定量的研究,稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)
二、原理
抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來,以此作為抗原或半抗原,通過免疫動(dòng)物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測(cè)組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無色的,因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來,以其達(dá)到對(duì)組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性,定位或定量的研究。
三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
四、注意事項(xiàng)
做石蠟包埋樣本保存及運(yùn)輸:常溫置于4%多聚甲醛固定液內(nèi)保存及運(yùn)輸(需注意固定液的量最好是組織的10倍以上,樣本需完全浸泡于固定液內(nèi)并防止樣本貼壁固定不良,大標(biāo)本最好使用大的標(biāo)本瓶/袋運(yùn)輸,建議在大標(biāo)本上按取材包埋要求做多條平行切口,以防標(biāo)本中心固定不透徹。運(yùn)輸過程中防止固定液滲漏)。